核酸纯化方法

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一：酚氯仿抽提—经典的纯化技术
酚氯仿抽提可算得上是核酸分离纯化技术中最经典的方法之一，该方法是由冷泉港实验室中的研究人员首先提取的，并被大量的科研究工作者进行改良使用。其原理是：在酚氯仿的共同作用下，蛋白质会被变性，形成不溶解的物质。由于蛋白质的密度小于酚而大于水，所以离心后，会在酚相和水相于之间，形成蛋白质中间层，从而有效地将蛋白质和核酸分离开来。由于DNA的抽提方式有很多，这个技术并没有被试剂公司接受。但是另一方面，使用酸性酚氯仿抽提RNA的纯化方式却被广泛接受（因为有效的RNA纯化方式并不多），其纯化原理为：在酸性酚的条件下，DNA溶解于有机相，RNA溶解于水相，而蛋白质则在中间相；从而有效地将DNA，RNA和蛋白质一起分开。该技术的创始人是Chomczynski。RNA-SolvReagent（OmegaBioTek）就是这一技术的改良产品。这一技术的最大优点就是经济，灵活。
二：盐析法—经济型核酸抽提技术
该技术原理是在组织或细胞裂解液中，加入高浓度盐（NaCl或NH4Cl，KI，KAC）来沉淀去除蛋白质，从而得到高纯度的基因组DNA。Omega公司在这一方面有着非常卓越的产品。基于这一技术的产品，其名称都有’SQ’。该系列的产品最大的优点就是：经济和灵活，是目前提取基因组DNA最经济的试剂盒。此外，Omega在首次研发了基于这一技术的DNA，RNA和蛋白质共提取的试剂盒，这一个目前最方面最快速的DNA，RNA和蛋白质共提取的试剂盒。
三：玻璃珠—第一个固液相核酸纯化技术
在高离液盐（盐酸胍，异硫氰酸胍，NaI）条件下，玻璃珠会同核酸发生吸附反应，而在低盐条件下，核酸又可以被洗脱下来。但是玻璃珠的残留以及干燥问题影响了这一技术的运用。至目前为止，大部分的公司已经去除这个纯化技术。早期的Omega也有许多基于这个技术的试剂盒，但是今天Omega公司只在凝胶回收中保留了这个试剂盒（Ultra-SepGelExtractionKit）。使用玻璃珠作为凝胶DNA片段回收的手段，有着别的技术难于达到的优点。
四：硅胶柱—将核酸抽提变成过滤操作
硅胶柱纯化技术，可以说是核酸纯化史上的一个里程牌。硅胶柱将核酸抽提或纯化变成一种简单的过滤操作，以取代传统溶液型抽提技术的离心方式。硅胶柱的纯化原理就是使用一种特殊的玻璃纤维滤膜，这种滤膜在高离液剂（盐酸胍，NaI,NaClO4）的条件下，可以同核酸发生吸附反应，而在低盐条件下，核酸又可以从滤膜中释放出来，蛋白质和其它杂质不会被吸附，从而达到纯化核酸的目的。硅胶柱的过滤吸附操作大大减少了抽提过程中离心和干燥时间，并去除耗时的醇类沉淀过程。此外，硅胶柱还第一次提供了一种高通量的纯化方式，大大加速了各种高通量筛选的科研项目，各种96孔板或384孔板的纯化方式纷纷出现。至目前为止，硅胶柱已经成为目前核酸分离纯化最主流的技术。在这一方面，Omega拥有目前市场上最全面最专业的试剂盒。从纵向而言，Omega拥有20多种质粒抽提试剂盒，60多种基因组DNA抽提试剂盒，40多种RNA抽提试剂盒以及10多种用于纯化的试剂盒。从横向而言，Omega公司还发展一系列针对性很强的试剂盒，如土壤，昆虫，软体动物，粪便样品核酸纯化试剂盒。我们深信，不论你的样品如何，都能在这里找到合适的试剂盒。


五：磁珠法—可完全自动化的核酸抽提操作
磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠，这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团，能同核酸发生吸附反应。硅磁（MagneticSilicaParticle）就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料，来吸附核酸，其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料（如DEAE，COOH）等，从而达到吸附核酸目的。不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就是自动化。磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散，从而可彻底摆脱离心等所需的手工操作流程。Omega拥有全面的磁珠法核酸分离试剂盒，基于这种技术的试剂盒，名称前都有’Mag-Bind’。

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