GelRed-核酸电泳用染料
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GelRed核酸染料(10,000×水溶液)
GelRed核酸染料特点
●无毒性:GelRed独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于EB。
●灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBRGreenI。
●稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
●信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
●操作简单:与EB一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
●适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA或ssDNA或RNA染色。
●无需改变滤光片及观察装置:标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。
GelRed使用方法简介
1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)
(1)制胶时加入GelRed核酸染料。每50mL胶中加入5μLGelRed核酸染料。(2)按照常规方法进行电泳即可。
注:此方法染色染料用量相对较少。500μL染料大约可以做100块50mL的胶。当染料稀释
在TBE或者类似的电泳缓冲溶液中时可以使用微波炉加热,从而与通常制备预制凝胶的方法相同。含有染料的预制凝胶可以成批制备,并可以长期保存直到使用。2.泡染法
(1)按照常规方法进行电泳。
(2)用0.1M的NaCl水溶液按照3300﹕1的比例稀释GelRed浓缩液,混匀,制成3×GelRed染
色溶液。(例如:在45mL水溶液中加入5mL1M的NaCl溶液及15μL10,000×GelRed水溶液。)
(3)将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振
荡染色30分钟左右,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上,让稀释液均匀地覆盖整个胶板,并染色30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
注:用泡染法染色时,染料用量较多。单次制备的染色溶液可重复使用3次左右。
>>>>几种核酸染料比较
>>>>>名称
GelRedGelGreenISYBRGreenISYBRGreenIIGoldViewIEB
特别提醒:如果您使用的是紫外成像仪,请选择GelRed;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择GelGreen。
灵敏度高高极高极高低低
稳定性高高稍差稍差高高
适用性通用大小片段电泳染色
通用大小片段电泳染色
100bp