ELISA方法大全
发布时间:
ELISA方法大全
ELISA试剂盒种类繁多,根据原理可大致分为间接法、夹心法、竞争法、捕获包被法(也称为反向间接法,比较少见)。其中各类型试剂盒的基本原理可以参考:>>>>【蛋白研究系列专题】-12丨ELISA>>>>方法知多少?(链接地址为:
http://mp.weixin.qq.com/s/PfZRQxBEP6cWt6FJyE7KXQ>>>>)以下为各类型ELISA试剂盒的抗原抗体连接顺序及适用类型:
>>>>>
方法连接顺序适用类型优势实例
仅改变包被
测定总抗体或
/间接法抗原即可检▌-sAg-lAb-Ab*
IgG抗体
测不同项目
测定二价或二价HBsAg、HBeAg、
抗体夹心法▌-sAb-lAg-Ab*高特异性
以上大分子抗原AFP、hCG检测
高灵敏度
抗原夹心法▌-sAg-lAb-Ag*测定抗体HBsAb检测
▌-sAg-lAb/Ab*
抗体竞争法Or
▌-sAb/lAb-Ag*▌-sAg/lAg-Ab*
抗原竞争法Or
▌-sAb-lAg/Ag*▌-santiIgMAb-捕获包被法
lIgM-Ag-Ab*
测定抗体测定只有一个抗原决定簇的小分子半抗原测定IgM,传染病的早期诊断
对干扰物质浓度要求低
肌酐检测CMVIgM、HAV-IgM检测、弓形虫
IgM检测HBcAb检测
/
注:
▌:吸附介质;/:竞争关系;-:结合Ag:抗原(antigen);sAg:固相抗原;lAg:游离抗原(即待测抗原);Ag*:酶标抗原Ab:抗体(antibody);sAb:固相抗体;lAb:游离抗体(即待测抗体);Ab*:酶标抗体(或酶标二抗)lIgM:游离IgM被测物以红色表示
上面的方法涉及到的是比较简单的方式,在实际运用中则会进行一些改良,下面举几个栗子!直接法:直接用酶标抗体结合抗原,或者直接用酶标抗原结合抗体。间接法:间接用酶标二抗结合特异性识别抗原的抗体。下面的栗子帮助大家理解。
栗子1
表中列出的两种夹心法属于直接夹心法,间接夹心ELISA则是基于两种不同种属来源的抗体,与直接法相比具有更高的灵敏度,常用来检测低丰度抗原样本。间接夹心ELISA的抗原抗体连接顺序为:▌-sAb1(species1-lAg