医疗机构使用中消毒剂的微生物污染检测及消毒剂供试品无菌检验的分析
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医疗机构使用中消毒剂的微生物污染检测及消毒剂供试品无菌检验的分析
作者：祝艳云曹萍
来源：《中国卫生产业》2015年第32期
DOI：10.16659/j.cnki.1672-5654.2015.32.130
[摘要]目的为了掌握该市各级医疗机构使用中消毒剂微生物污染情况，加强使用中消毒剂的管理，降低院内感染率。方法在使用现场采集各医疗机构使用中消毒剂，对采集的消毒剂进行污染菌检测；《医疗卫生消毒标准2012版（合订本）》。结果使用中消毒剂合格率为82.6%，醇类消毒剂的合格率为92%，过氧化物类为79.3%，含氯消毒剂为97.6%，碘类消毒剂为98%，醛类消毒剂为76.0%，酚类消毒剂为99.0%；菌落总数超标率为5.5%，霉菌和酵母菌检出率为1.3%，金黄色葡萄球菌检出率为2.0%，铜绿假单胞菌检出率为0.8%，乙型溶血性链球菌检出率为1%。结论对使用中的消毒剂要加强管理，正确配制与使用，定期抽样检测，降低院内感染。
[关键词]医疗机构；消毒剂；微生物；污染；检测
[中图分类号]R187[文献标识码]A[文章编号]1672-5654（2015）11（b）-0130-03为了掌握该市各级医疗机构使用中消毒剂微生物污染情况，加强使用中消毒剂的管理，降低院内感染率。在使用现场采集各医疗机构使用中消毒剂，对采集的消毒剂进行污染菌检测；《医疗卫生消毒标准2012版（合订本）》。1资料与方法1.1样品采集
用无菌方法采取被检消毒药10mL，加入到20mL无菌试管中，4h内送检。1.2检验过程
1.2.1菌落总数测定（1）样品处理：用无菌吸管吸取消毒液1.0mL，加入到9.0mL含相应中和剂的无菌生理盐水中，震荡20s或80次，取1：10稀释液进行检测。
（2）实验步骤：利用灭菌后的吸管提取稀释10倍的检测液，共提取2mL，将检测液分别注入两个消毒后的培养皿上（每份1mL）。然后再取去同样的检测液1mL，将其加入到9mL的无菌生理盐水当中，充分震荡约20s后制成稀释100倍的检测液，再提取2mL该检测液，将其分别注入两个消毒后的培养皿内。选择普通琼脂放入水浴锅中融化，待其冷却到
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50℃左右后倾倒在各培养皿上，每个培养皿内倾倒约15mL，倾倒后立即摇动培养皿，使内部的琼脂能够与检测液充分的缓和。待琼脂完全凝固后可采用倒置培养方法，恒温培养箱的温度设定为36℃，培养时间为48h。另外选择一个空白无菌培养皿，将制备的琼脂倒入其中，待自然凝固后放入恒温培养箱内，温度和培养时间与检测液相同，作为对照组。
（3）实验报告：在培养完毕后利用肉眼对培养皿中菌落的数量进行观察，在完全记录菌落数量后，将其放在5～10倍的电子放大镜下进行复查，提高菌落计数的准确率。记录同一稀释浓度下培养皿内菌落的数量，取平均值作为菌落生长数。选择其中菌落生长数量在30～300之间的培养皿，将菌落数与1mL消毒剂内所含有的菌落数量相乘，单位设定为CFU/mL，如果一个稀释度内无病菌生长，其报告内菌落指数应低于10CFU/mL。
1.2.2霉菌、酵母菌的测定（1）实验步骤：选取稀释度为10倍、100倍和1000倍的检测液1mL，分别将其注入到无菌培养皿中，每个稀释度检测液各放入两个培养皿中。选择沙堡罗琼脂放入水浴锅内融化，在温度冷却到45℃时，将琼脂倒入培养皿当中，并立即进行摇动混匀，采用倒置方法在恒温培养箱内进行培养。培养箱内温度设定为28℃，培养时间为72h，在培养结束后详细记录培养皿上霉菌和酵母菌的数量。另外需要选择一个未添加检测液的无菌培养皿，将沙堡罗琼脂倒入培养皿内，并在琼脂凝固后放入恒温培养箱当中，温度和培养时间也检测液相同，作为对照组。
（2）实验报告：先对每一个培养皿上生长的菌落数量进行统计，并计算每个稀释浓度菌落数量的平均值，选择菌落生长数量在5～50的培养皿，将菌落数与稀释倍数相乘，所得结果即为每毫升消毒剂当中所含有的霉菌和酵母菌的总数。
1.2.3致病菌的检测（1）金黄色葡萄球菌的检测：①病菌培养方法：选择稀释10倍的检测液，将其加入两倍浓缩的氯化钠肉汤当中，该肉汤的浓度为7.5%，其中检测液共10mL、肉汤10mL。将该培养皿放入恒温培养箱中进行培养，温度设定为36℃，培养时间为24h。②病菌分离培养：利用接种环将培养皿当中的病菌取出，采用划线法进行接种，培养基为血琼
