1 前后2个片段的PCR gene Cf+ mutation Ct / mutation cF + gene Ct(10-20)

模板 2 ul

F 3 ul

R 3ul

d NTP 5ul

10 X buffer 5ul

Mg 2+ 2ul

Enzyme 1ul

H2O 30ul

Total 50ulword/media/image1.gif

2 前后片段 搭桥PCR

d NTP 10ul

10 X buffer 10ul

Mg 2+ 4ul

片段1 5ul

片段2 5ul

Enzyme 2ul

H2O 64ul

Total 100ulword/media/image1.gif

57摄氏度 2个cycle

补加 全长引物 68-58 摄氏度

补加体系

F 3ul

R 3ul

d NTP 5ul

10 X buffer 5ul

Mg 2+ 2ul

Enzyme 1ul

H2O 30ul

Total 50ulword/media/image1.gif

搭桥PCR