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发布时间:1714338585


细胞培养用品的清洗与消毒v2.0
一、清洗
1、玻璃类
流程:浸泡T刷洗和烘干T浸酸T冲洗
要求:清洗后的玻璃器皿干净透明无油迹,水滴不成股流下具体操作:新买:5%稀盐酸浸泡过夜自来水冲洗T洗洁精刷洗2宀自来水冲洗(晾干或烘干50CT浸酸(一天一夜)3~4T自来水冲洗25T蒸馏水洗5T双蒸水洗3次(或再用单蒸水冲洗5次干热灭菌(将温度升至150C后关闭烘箱密闭3h,待冷却至常温)6T使用
已用:用后马上浸入洗洁精中浸泡一天7(带毒应浸入消毒水)T涤剂刷洗后自来水冲洗(晾干或烘干50°CT浸酸(—天—夜)T自来水冲洗25T蒸馏水洗5T双蒸水洗3次(或再用单蒸水冲5次)T干热灭菌(将温度升至150C后关闭烘箱密闭3h,待冷却至常温)T待使用
1.新的初次使用的玻璃器皿,在生产及运输过程中,玻璃表面带有大量的干固的灰尘,且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等,5%稀盐酸液浸泡过夜,以中和其中的碱性物质
2.刷洗要适度,过度会损害器皿表面光泽度
3.清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用,而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质。浸泡时器皿要充满清洁液,勿留气泡或器皿露出清洁液面
4.浸泡时间:一般为过夜,不应少于6小时
5.最好用洗涤装置如用手工操作需流水冲洗十次以上,每次水须灌满及倒干净,然后用蒸馏水清洗3-5次,晾干(或烘干)备用
6.或高压蒸汽灭菌(湿热法),容器水分烘干T牛皮纸包内、报纸包外将容器口扎紧T121C,30min高压灭菌T待使用
7.用后立即浸入水中,要求完全浸入,不能留有气泡或浮在液面
2、塑料类具体操作:新买:一次性无菌塑料制品打开包装即可使用
已用:用后立即用流水冲洗T洗涤剂浸泡3小时后刷洗(用纱布或棉签)T自来水冲洗T5%稀盐酸浸泡过夜T双蒸水煮沸2~310min/次)T包装烘干(50CT待使用
3、橡胶类
具体操作:
新买/已用:用后立即用流水冲洗T洗涤剂浸泡3小时后刷洗(用纱布或棉签)T自来水冲洗T5%稀盐酸浸泡过夜T双蒸水煮沸2~310min/次)T包装烘干(50CT待使用
4、镊子、剪刀
具体操作:
洗涤剂刷洗-自来水冲洗5~6-75%医用酒精浸泡3小时-酒精棉球1拭—待使用
注意1.酒精棉球应用双蒸水配置
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5不锈钢除菌滤器
具体操作:
洗涤剂刷洗滤器-流水冲洗15min-蒸馏水冲洗2~3次(或浸泡24h-蒸水冲洗2~3次(或24小时)-干燥-备用
6金属滤网
具体操作:
自来水冲洗-蒸馏水冲洗-三蒸水冲洗-干燥-备用
二、消毒
1.紫外线:用于空气,操作台表面和不能使用其它法进行消毒的培养器皿。消毒时间30~60min(至少)
2.高压蒸气灭菌法(湿热):15磅,121C,20min
培养用液、橡胶制品
布类、玻璃制品、金属器械等
冷空气骤然进入引起玻璃炸裂,影响消毒效
果。
l0l0min1520min
3.干烤:160C,2h(适用于玻璃器皿等)注意:消毒后不要立即打开箱门,以防止4.75%酒精:主要用于操作者的皮肤,操作台表面及无菌室内的壁面处理,一般要求为70%~75%的乙醇,用蒸馏水配制
5.抗生素:主要用于培养用液灭菌或预防培养物污染。常用的抗生素:青霉素(浓度是100^gml
链霉素(100/ml
附酸液配制:
酸液配制:重铬酸钾(g):浓硫酸(ml):蒸馏水(ml
强清洁液631000:200次强清洗液1202001000弱清洁液(常用)1001001000
(危险!请勿单独配制此溶液)
具体以配置10000ml常用清洁液为例介绍如下操作:1.先在搪瓷盆或塑料盆中加入蒸馏水8000ml,2称取1000g重铬酸钾,用玻璃棒搅拌直至溶解(可加热以辅助溶解),
3.待重铬酸钾液冷却后,缓慢加入1000ml浓硫酸,边加边用玻璃棒,以混合液温度不过快上升和不出现重铬酸钾结晶为度。4.配好后倒入洗液缸中备用。要求:
1新配制的清洁液呈棕红色。当使用时间过久,清洁液的颜色变暗、发绿或混浊时,应弃去(深埋地下),配制新的。
2配制、盛装清洁液的容器应防酸、耐热、有较大的开口,一般用瓷缸、玻璃制品或耐酸塑料制品。1.配制时应注意安全,须穿戴耐酸手套和围裙,并要保护好面部及身体裸露部分
2.配制过程中可使重铬酸钾溶于水中,然后慢慢加浓硫酸。并不停的用玻璃棒搅拌,使产生的热量挥
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