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菌种培养
发布时间:2024-01-10 04:32:54
在自然界里,食用菌都不是单独存在的,而是和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一起的。所谓菌种分
离,就是把这些和食用菌一起生活的杂菌分离出来,通过培养,获得纯的优良菌种。菌种分母种、原种、栽
培种。
(
一)母种的分离培养
食用菌母种的分离,可分为孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等。
1.
孢子分离法
孢子分离法,
是用食用菌的有性孢子或无性孢子萌发成菌丝,
培养成菌种的方法。
这种菌种生活力较强,
但孢子个体之间有差异,且自然分化现象较严重,变异大,需经出菇试验才能在生产上应用。
(
l
)单孢分离法:是每次或每支试管只取一个担孢子,
让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。蘑菇
和草菇用单孢分离得到的菌丝,有结实能力,可采用此法分离生产纯菌种。单孢分离生产上较少采用,而且
技术复杂,一般采用多孢分离法。
(
2
)多孢分离法:就是把许多孢子接种在同一培养基上,让它们萌发、自由交配来获得食用菌纯菌种的
一种方法。具体操作方法,有以下几种:
①
种菇孢子弹射法:选择个体健壮、朵形圆正,无病虫害、出菇均匀、高产稳产,适应性强的八九分成
熟的种菇,切去大部分,菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的
纱布或脱脂棉、滤纸吸干表面水分。在接种
箱或无菌室内,把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面,漏斗倒盖在培养皿上面;上端小孔用棉花塞
住。培养皿放
在一个铺有纱布的搪瓷盘上,静置
12
~
20
小时,菌褶上的孢子就会散落在培养皿内。形成一
层粉末状孢子印(平菇极淡紫色,蘑菇、草菇
为褐色,香菇、金针菇孢子印白色)。用接种针沾取少量孢子
在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种。待孢子萌发,生成菌落时,选孢子萌发早、长势好的菌落进
行试
管培养。
还可用孢子采集器收集孢子。方法是选好种菇后,按上述程序,轻轻掀开玻璃钟罩,将种菇柄朝下插在
孢子采收器的钢丝架上,放在培养皿正中央。随即盖好玻璃罩,用纱布将钟掌周围塞好。并在纱布上倒少许
升汞或无菌水。移入
20
℃左右恒温箱培养。
②褶上涂抹法:按无菌操作分离时;应选择成熟的种菇,用接种针直接插入褶片之间,轻轻抹取褶片表
面子实体尚未弹射的孢子,再在培养基上划线接种。
③钩悬法:取成熟菌盖的几片菌褶或一小块耳片(黑木耳、毛木耳、白木耳〕,用无菌不锈钢丝(或铁
丝、棉线等其他悬挂材料)悬挂于三角瓶内的培养基的上方,勿使接触到培养基或四周瓶壁。置适宜温度下
培养、转接即可。
④贴附法:按无菌操作将成熟的菌褶或耳片取一小块,
用溶化的琼脂培养基或阿拉伯胶、
浆糊等贴附在
配管斜面培养基正上方的试管壁上。经
6
~
12
小时的培养,待孢子落在斜面上,立即把孢子连同部分琼脂培
养基移植到新的试管中培养即可。
孢子分离得到的母种、必须进一步提纯复壮,当母种定植一星期左右,菌丝布满斜面时,选择菌丝健壮、
生长旺盛无老化、无感染杂茵的母种试管,进而转管扩大,一般到栽培种,转管不宜超过
5
次。
孢子分离得到的母种,必须通过出菇试验,鉴定为优质菌种后,才可供生产使用。
一般菌类如蘑菇、平菇、凤尾菇、香菇、冬菇和草菇等,都可用多孢分离法获得母种。
现就银耳孢子分离略述于下:
按
无菌操作获取种耳后,悬挂种耳的三角瓶经
12
小时培养后,瓶底培养基表面就有
"
孢子印
"
。取出种
耳,
置
20
℃—
25
℃温箱培养
2
~
3
天,
培养基表面会出现乳白色透明的糊状小菌落,
就是银耳的酵母状分生
孢子形成的少量银耳菌丝。此时移接入试管斜面培养基上,
待长满斜面后,再移接入营养丰富,且表面比较
干燥的培养基上。经
30
天左右,菌落长出白色菌丝。
菌种培养
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