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发布时间：2023-10-10 12:39:21
１２ 中国计划生育学杂志２０１７年１月第２５卷第１期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｆａｍ Ｐｌａｎｎ，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ ２０１７ ・基础研究・ 左炔诺孕酮的多晶型研究 徐娟 宁丽峰 李 鹏 王慧萍 国家卫生计生委科学技术研究所（北京，１０００８１） 摘要 目的：研究紧急避孕药左炔诺孕酮的多晶型现象。方法：通过多种物理（化学）方法对左炔诺孕酮进行多晶型 筛选，采用粉末ｘ射线衍射（ＰＸＲＤ）技术对筛选得到的多晶型样品进行表征。结果：左炔诺孕酮具有低溶解性与低渗 透性性质，通过多晶型筛选获得左炔诺孕酮的ａ、ｐ、Ｂ ３种晶型。３种晶型样品ＰＸＲＤ图谱的衍射峰位置、衍射峰数 量、衍射峰强度、衍射峰几何拓扑等特征均存在明显差异。结论：左炔诺孕酮存在ａ、Ｂ、Ｂ ３种晶型，通过ＰＸＲＤ技术可 对左炔诺孕酮３种晶型进行鉴别。 关键词左炔诺孕酮；多晶型现象；晶型鉴别 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４—８１８９．２０１７．Ｏ１ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｓ ｏｆ Ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ ＸＵ Ｊｕａｎ，ＮＩＮＧ Ｌｉｆｅｎｇ，ＬＩ Ｐｅｎｇ，ＷＡＮＧ Ｈｕｉｐｉｎｇ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｆａｍｉｌｙ Ｐｌａｎｎｉｎｇ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，１０００８１ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ｗｆｗｈｐ＠１６３．ｃｏｒｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊ ｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｓ ｏｆ Ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ ａｓ ｅｍｅｒｇｅｎｃｙ ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｖｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｏｒ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｇｅｔ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｓ ｏｆ Ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅ１．Ｔｈｅｓｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｓ ｗｅｒｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ Ｘ—ｒａｙ ｐｏｗｄｅｒ ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ（ＰＸＲＤ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ ｈａｄ ｎａｔｕｒｅ ｏｆ ｌｏｗ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｌｏｗ ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ． Ｔｈｒｅｅ ｃｒｙｓｔａｌ ｆｏｒｍｓ ｏｆ Ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ（ｆｏｒｍ ａ，ｆｏｒｍ ８ ａｎｄ ｆｏｒｍ Ｂ）ｗｅｒｅ ｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ＰＸＲＤ ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ ｐｅａｋｓ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｉｎ ｐｏｓｉｔｉｏｎ，ｎｕｍｂｅｒ，ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ ａｎｄ ｇｅｏｍｅｔｒｉｃ ｔｏｐｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ｔｈｒｅｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ ｉｎ Ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ，ｗｈｉｃｈ ｉｎｃｌｕｄｅ Ｆｏｒｍ ａ，ｆｏｒｍ ８ ａｎｄ ｆｏｒｍ Ｂ，ａｎｄ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｆｏｒｍｓ ｃａｎ ｂｅ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ＰＸＲＤ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｌｅｖｏｎｏｒｇｅｓｔｒｅｌ；Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；Ｕｓｅｆｕｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｓ 左炔诺孕酮分子式为Ｃ２１Ｈ。。Ｏ ，分子量为 ３１２．４５，系统命名为Ｄ（一）一１７ｕ一乙炔基一１７１３一羟基一１８一 甲基雌甾一４一烯一３一酮，ＣＡＳ号为７９７—６３—７＿１］。左炔诺 研究发现，左炔诺孕酮存在多晶型现象，目前报道的 物质状态有４种（ａ晶型，８晶型，Ｂ晶型，无定 型）［７－９］。本研究对左炔诺孕酮原料药的晶型进行筛 查，并采用粉末Ｘ射线衍射（ＰＸＲＤ）技术对筛选得 到的晶型样品进行表征。 孕酮与雌激素合并使用，组成短效或长效口服避孕 药，作为探亲避孕药和紧急避孕药应用广泛＿２］。固 体药物一般都是晶型药物＿３］。不同的药物晶型可影 响药物的理化性质，从而影响临床治疗效果 ］。因 此，对药物进行多晶型筛查，寻找其不同晶型状态， １材料与方法 １．１仪器及实验条件 并对各种晶型状态进行成药性分析及安全性评价， 以此确定药用优势晶型，对于控制药物生产质量，增 渗透压摩尔浓度测定仪：ＳＭＣ ３０Ｄ，天河仪器 分析有限公司（中国天津）。粉末ｘ一射线衍射仪： Ｂｒｕｋｅｒ Ｄ２ ＰＨＡＳＥＲ，布鲁克分析有限公司（德国）。 加药物稳定性，保证药物临床疗效有重要意义 ］。 基金项目：２０１６年国家重点研发计划（２０１６ＹＦＣ１０００９００） 收稿日期：２０１６—１０—２７修回日期：２０１６－１ｌ－２４ 通讯作者：ｗｆｗｈｐ＠１６３．ＣＯＩＴＩ 测试条件：常温，光源为Ｃｕ Ｋａ（１．５４１８ Ａ），电压为 ３Ｏ ｋＶ，电流为１０ ｍＡ，测试步长为０．０１４ｏ，扫描速 度为０．１ ｓ／ｓｔｅｐ，扫描范围为５－４０ｏ（２０）。
中国计划生育学杂志２０１７年１月第２５卷第１期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｆａｒｏ Ｐｌａｎｎ，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ ２０１７ １３ １．２材料 １．３．３渗透压摩尔浓度测定 用一定体积新鲜制备 的蒸馏水调节渗透压摩尔浓度测定仪的零点，然后 左炔诺孕酮原料药来自华润紫竹药业有限公 司，批号为２０１５１２１０，纯度为９９．９０ 。实验中使用 溶剂均为分析纯。 １．３方法 先用１Ｏ 十二烷基硫酸钠（ＳＤＳ）溶液校正仪器，再 加入５００ｍｇ左炔诺孕酮样品测定渗透压摩尔浓度。 １．３．４ ＰＸＲＤ样品制备将获得的左炔诺孕酮晶型 １．３．１溶解性测定 根据《中国药典》规定方法对左 炔诺孕酮样品的溶解性进行测定，溶剂包括：吡啶、 四氢呋喃、三氯甲烷、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、甲 醇、乙醇、乙腈、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、甲酸乙酯、乙 样品研磨后过１００目筛，精密称取５０ｍｇ作为 ＰＸＲＤ样品。 ２结果 ２．１溶解性及渗透性 溶解性测定结果显示，左炔诺孕酮属于水不溶 酸甲酯、甲酰胺、二氧六环、二氯甲烷、乙酸异丙酯、 ５０ 乙醇、正丙醇、丙二醇、仲丁醇、异丙醇、正丁醇、 异戊醇、乙二醇、水、庚烷、环己烷、甲基叔丁基醚、异 丙醚。 样品，即低溶解性样品（表１）。１０ ９／６ＳＤＳ溶液的渗 透压摩尔浓度为４９ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ，加入５００ｍｇ左炔 诺孕酮样品后的渗透压摩尔浓度为６５ｍＯｓｍｏｌ／ ｋｇ，故左炔诺孕酮为低渗透性样品。因此，左炔诺 孕酮属于生物药剂学分类系统（ＢＣＳ）中的第１Ｖ类 １．３．２晶型筛选依照溶解性质使用溶液挥发法、冷 却结晶法、混悬法、反溶剂滴加法、气液扩散法、超声 法、研磨法、混合溶剂挥发法等对左炔诺孕酮进行多 晶型筛选。 药物，具有低溶解性与低渗透性性质。 表１左炔诺孕酮在不同溶剂中的溶解性 溶 剂 溶解性 溶解 略溶 微溶 吡啶、四氢呋喃、三氯甲烷 二甲基亚砜，二甲基甲酰胺 甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、丁酮、乙酸乙酯、甲酸乙酯，乙酸甲酯、甲酰胺、二氧六环、二氯甲烷 乙酸异丙酯 水、５Ｏ 乙醇、正丙醇、丙二醇、仲丁醇、异丙醇、正丁醇、异戊醇、乙二醇、庚烷、环己烷、甲基叔丁基醚、异丙醚 极微溶解 几乎不溶或不溶 ２．２晶型物质状态筛查 三氯甲烷、乙醇使样品完全溶解，微孔滤膜过滤，滤 液放置于２０℃，通过溶剂蒸发得块状晶体，研磨过 筛得白色粉末样品，即为ａ、Ｂ、Ｂ晶型 ２．４ ＰＸＲＤ法的晶型表征 左炔诺孕酮ａ晶型、Ｂ晶型、Ｂ晶型的ＰＸＲＤ图 筛查获得左炔诺孕酮３种晶型物质：ａ晶型、Ｂ 晶型、Ｂ晶型。见表２。 表２左炔诺孕酮的晶型筛查结果 筛查方法 溶液挥发法 冷却结晶法 混悬法 获得晶型 ａ，Ｂ，Ｂ Ｂ Ｂ 筛查方法 气液扩散法 超声法 研磨法 获得晶型 Ｂ Ｂ Ｂ 谱见图１。ａ晶型的衍射峰：１３．５。（４５ ），１４．０。 （４０ ），１４．５。（１５ ），１７．１。（１００ ）；口晶型的衍射 峰：１３．６。（９５ ），１４．４。（１００ ）；Ｂ晶型的衍射峰： １３．８。（１Ｏ０ ），１４．１。（４５ ），１４．４。（９８ ），１５．２。 反溶剂滴加法 Ｂ，Ｂ 混合溶剂挥发法 ａ，Ｂ，Ｂ （２０ ），１６．１。（７０ ９／６），１７．５。（２５ ９／６），２０．０。（４０ ）， ２．３晶型样品制备工艺 ２１．２。（３０ ），２３．６。（２０ ），２５．２。（１８ ）。 称取左炔诺孕酮原料药１ｇ，分别用适量甲醇、
１４ 中国计划生育学杂志２０１７年１月第２５卷第１期Ｃｈｉｌ■Ｈ帅 Ⅱ晶型 ｌ眦●－－‘蜉 、～ ＾ ．、 Ｌ一＾ －Ｉ ＾． １３晶型 １●ｌ●－柚哼 Ｂ晶型 图１ 左炔诺孕酮ａ、Ｂ、Ｂ晶型样品的粉末Ｘ射线衍射图谱 ３讨论 左炔诺孕酮是甾体激素类药物，水溶性差，易出 ｎ Ｊ Ｆａｍ Ｐｌａｎｎ，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ ２０１７ 现多晶型现象。本研究通过对左炔诺孕酮进行多晶 型筛查，获得并制备了左炔诺孕酮的３种晶型物质 （ｄ晶型、Ｇ晶型、Ｂ晶型）。ＰＸＲＤ是物理分析手段， 待测物质的原子对ｘ射线具有衍射效应，因此可以 利用Ｘ射线对所测物质进行结构、成分和晶型分 析＿１ 。同一药物的不同晶型状态，其ＰＸＲＤ图谱非 常可能具有专属性口¨。本研究采用ＰＸＲＤ法对左 炔诺孕酮３种晶型物质进行表征，获得了３种晶型 物质的ＰＸＲＤ标准图谱。ＰＸＲＤ图谱表明，左炔诺 孕酮３种晶型的衍射峰位置、衍射峰数量、衍射峰强 度、衍射峰几何拓扑等特征均存在差异，因此这３种 晶型物质的ＰＸＲＤ图谱可以为左炔诺孕酮的晶型 识别、晶型定量分析、左炔诺孕酮的药品质量控制、 工业生产工艺、杂质检测和药物产品质量均一性提 供科学数据与标准口 。左炔诺孕酮的多晶型现象 可能对药效产生一定影响，生物利用度可能相差几 ｌ ２ 倍乃至十倍以上＿１ ；使用不同晶型的左炔诺孕酮药 效成分时，可能无法达到有效血药浓度，导致避孕失 败。同时，对左炔诺孕酮多晶型的研究可以从原料 药层面解决因晶型物质状态改变而造成的不同厂 家、不同批次临床效果、毒副作用的不稳定问题。因 此，左炔诺孕酮的多晶型研究对于提高避孕有效率， 促进育龄人群的有效应用具有重要意义。 参考文献 ３
２０ 中国计划生育学杂志２０１７年１月第２５卷第１期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｆａｍ Ｐｌａｎｎ，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．１，Ｊａｎｕａｒｙ ２０１７ （２０１３）［Ｍ１．北京：中国人口与计划生育年鉴出版社，２０１４， 参考文献 １－１］国家人口和计划生育委员会．中国人ＶＩ和计划生育史［Ｍ］．北 京：中国人口出版社，２００７，１５６—１６Ｏ． １９８． 郑树衡，贺昌海．皮下埋植剂研究及临床应用［Ｊ］．生殖与避 孕，１９９５，１５（１）：３－７． ［２］黄紫蓉，吴尚纯．口服避孕药的发展和使用现状［Ｊ］．国际生殖 健康／计划生育杂志，２００９，２８（３）：１３９—１４４． 余国斌，刘庆，唐碧滔，等．国产Ｉ、Ⅱ型皮下埋植剂的临床应用 研究［Ｊ］．中国计划生育学杂志，２００４，５：２８９—２９２． 张玉风，武俊青．女用避孕套研究进展［Ｊ］．中国计划生育学杂 志，２０１３，２１（１）：６６－６９． ［３］ 肖碧莲，吴尚纯．米非司酮用于避孕的系列临床研究进展［Ｊ］． 中华妇产科杂志，２００３，３８（８）：４９９—５０１． ［４］ 肖碧莲，Ｈ ｙｏｎ，Ｈｅｒｔｚｅｎ，赵珩，等．两种单剂量米非司酮用于紧 茅群霞，董绍壬，肖远鸿．青年志愿者国产女用避孕套可接受 急避孕的随机双盲比较研究［Ｊ］．中华医学杂志，２００３，８３（１０）： ８１３—８１８． 性调查［Ｊ］．国际生殖健康／计划生育杂志，２０１４，３３（３）：２２３— ２２７． ［５］吴尚纯，王翠萍，王幼劬，等．左炔诺孕酮和小剂量米非司酮用 茅群霞，董绍壬，肖远鸿．育龄青年志愿者女用避孕套知晓率 于紧急避孕的临床观察［Ｊ］．中华妇产科杂志，１９９９，３４（６）：３２７ 多中心调查［Ｊ１．中国计划生育学杂志，２０１４，２２（４）：２４３—２４７． 席毛毛，汪燕，贾丽丽，等．两种女用避孕套使用性能的随机交 叉试验研究［Ｊ］．中国计划生育学杂志，２０１４，２２（６）：３９０—３９３， ３９８． ３３０． Ｅ６３尹淑，晏永莲，李力．米非司酮临床研究进展［Ｊ］．中国计划生育 和妇产科，２０１４，６（３）：２０—２２． ［７］邹燕，李幼平，干昌平，等．米非司酮配伍米索前列醇行早期妊 娠药物流产的有效性评价口］．中国循证医学杂志，２００５，５（８）： 口 口 口 口 口 口 Ｉ二 ６１９－６３１． 阳 刀 叼 席毛毛，李艳，张黎峰，等．在女性性工作者中推广国产女用避 孕套的影响因素分析口］．中国计划生育学杂志，２０１３，２１（９）： ５９５—５９８． Ｅ８］杨红，陈红，王瑚，等．戊酸雌二醇联合米非司酮、米索前列醇治 疗稽留流产的系统评价［Ｊ］．武汉大学学报（医学版），２０１４，３５ （４）：６５１—６５６． 妇 侯丽艳，邱红燕，曾宪森，等．国产凤康ＴＭ牌与进口Ｆｅｍｉｄｏｍ 牌聚氨酯女用避孕套性能的随机交叉试验研究［Ｊ］．中国艾滋 病性病，２００９，１５（４）：３５９—３６２． ［９］罗晓梅．米非司酮配伍米索前列醇在中孕稽留产中的应用［Ｊ］． 昆明医学院学报，２００５，（１）：１３０—１３１． 席毛毛．两种女用避孕套试用性能随机对照交叉试验［Ｄ］．北 京协和医学院，２０１４，１３． ［１Ｏ］顾静，杨克虎，张莉，等．米非司酮治疗围绝经期功能失调性 子官出血疗效与安全性的系统评价［Ｊ］．中国循证医学杂志， ［２２］ Ｔｅｒｅｓａ Ｓａｌｉｋｕ，Ｒｈｏｕｎｅ Ｏｅｈａｋｏ，Ｃｈｉｍａｒａｏｋｅ Ｉｚｕｇｂａｒａ．Ｕｓｅ ０ｆ ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｖｅｓ ａｍｏｎｇ ｗｏｍｅｎ ｉｎ Ｎａｉｒｏｂｉ， Ｋｅｎｙａ．Ｐｏｌｉｃｙ Ｂｒｉｅｆ．２Ｏ１ｌ，２６． ２Ｏ１２，１２（４）：４５Ｉ－４５９． ［１１１吴尚纯，邹燕．宫内节育器应用现状与研究进展［Ｊ］．中国实用 妇科与产科杂志，２００９，２５（１０）：７９５～７９７． ［２３］蒋晓晓．中非卫生合作的特点：基于刚果民主共和国的案例 研究［Ｊ］．中国卫生政策研究，２０１４，７（３）：６４—６８． ［责任编辑：张璐］ ［１２］中国人口与发展研究中心．人口和计划生育常用数据手册 （上接１４页） ［５１ Ｒ６ｔｈｅｌ Ｃ，Ｅｈｍａｎｎ ＨＭＡ，Ｂａｕｍｇａｒｔｎｅｒ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｘｔｕｒｅ ａｎｄ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈ ｏｆ ｐｈｅｎｙｔｏｉｎ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｉｎ ｆｉｌｍｓ ａｎｄ ｉｔｓ ２０ｌ５／０６４４７９［Ｐ］．２０１５—０５—０７． ［１ｏ］Ｂｏｂｒｏｖｓ Ｒ，Ｓｅｔｏｎ Ｌ，Ｄｅｍｐｓｔｅｒ Ｎ．Ｔｈｅ ｒｅｌｕｃｔａｎｔ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈ： ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｅｌｆ—ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｈｅ ｓｏｌｖｅｎｔ ｉｍｐａｃｔ ｏｎ ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｒｙｓｔｅｎｇｃｏｍｍ，２０１６，１８（１２）：５１９２ ５１９８． ｍｅｄｉａｔｅｄ ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｕｃｌｅａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｏｐｈｙｌｌｉｎｅ ［６］ Ｆｕｊｉｋｉ Ｓ，Ｗａｔａｎａｂｅ Ｎ，１ｗａｏ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ ｆｒｏｍ ｔａｂｌｅｔｓ ｂｙ ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ ｐｈａｓｅ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ［Ｊ１．Ｃｒｙｓｔｅｎｇｃｏｍｍ，２０１５，１７（１）：５２３７—５２５１． ［１１］Ｊｕａｎ ＨＣ，Ｌｉｕｉｓ ＳＣ，Ｇｌｏｒｉａ ＦＰ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈ ｏｆ １一（２，６一 ｄｉｆｌｕｏｒｏｂｅｎｚｙ１）一１ｈ一１，２，３－ｔｒｉａｚｏｌｅ—ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ：ＥＰ ２７２７９１４ ｍｅｔａｓｔａｈｌｅ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈ ｆｏｒｍ Ｉ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉ 