邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导

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实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法
、实验目的:
1.掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法;2.学会标准曲线的绘制方法及其使用。、原理:
1.定量分析依据:A=κbc2.有关反应:

4Fe3++2NH2OH·HCl=4Fe2++N2O+4H++2H2O+2Cl
橙红色配合物
3.显色条件
pH值控制:pH≈。显色时间:15min显色温度:室温
显色剂及用量:邻二氮菲4.测量条件
λmax=510nm
参比溶液:试剂空白吸光度范围:、仪器:
可见分光光度计,1cm比色皿、100mL容量瓶1个,20mL移液管1支,50mL容量瓶10个,10mL吸量管1支,1mL吸量管(或移液管)1支,5mL移液管1支,2mL移液1支。、试剂:
①铁贮备液(100µg/mL):准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[NH42FeSO42·6H2O]100毫升烧怀中(或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO42·12H2O,其摩尔质量为
482.18g/mol,加50毫升1+1H2SO4,完全溶解后,移入1000ml的容量瓶中,并用水稀
释到刻度,摇匀,此溶液中Fe的质量浓度为µg/mL。(实验室准备好)
铁标准溶液(μg·mL1移取μg·mL1铁标准溶液于100mL容量瓶中,并用蒸馏水稀释至标线,摇匀。(学生自行配制10%盐酸羟胺水溶液:(用时配制)
%邻菲罗啉水溶液:配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解,再用水稀释至所需体积。(临用时配制)或(避光保存,两周内有效)
HAc-NaAc缓冲溶液(pH≈):称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中,加水溶解后稀释至100毫升。1

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五、测定步骤:1、标准曲线的绘制:
1)分别吸取铁的标准溶液、、于750ml容量瓶中,加水至刻度;
2)依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml,混匀,加入5mlpH≈缓冲溶液,摇匀,加入%邻菲罗啉溶液2ml,摇匀,
3)放置15分钟后,在510nm波长处,用1cm比色皿,以试剂空白作为参比,测定各溶液的吸光度。
721型分光光度计操作过程:
1.检查仪器各调节钮的起始位置是否正确,选择波长,并将灵敏度档置第12.接通电源,打开开关
3盖上比色皿暗盒盖,用调100%调节器使电表指针处于透过率100%位,打开比
色皿暗盒盖,用调0调节器使电表指针处于透过率0位;预热20min4.放入参比溶液及试样溶液
5.校准:拉动吸收池拉杆,使参比溶液置于光路中,打开比色皿暗盒盖,用调0
节器使电表指针处于透过率0位;盖上比色皿暗盒盖,用调100%调节器使电表指针处于透过率100%位。重复校正至稳定
6.若调100%调节器不能使电表指针处于透过率100%位,打开比色皿暗盒盖,则
应放大灵敏度,重新调整直至稳定
7.盖上样品盖,拉动吸收池拉杆,依次将待测溶液推入光路,读出吸光度值A。连
续读数后,立即打开比色皿暗盒盖,取出吸收池,参比溶液不取出。
8.再放入其他浓度待测溶液,继续调0100%,按前面的“校准”步骤重新调整
直至稳定,再测量其他浓度待测溶液的吸光度A
9.测量完毕,取出吸收池,各旋钮置于原来位置,电源开关置于拔下电源插头。10.比色皿用纯水洗净后倒置于滤纸上晾干。
4)以吸光度为纵坐标,铁含量(µg,50ml)为横坐标,用软件(excelorigin)绘制出标准曲线。

V(铁标液)/mL
ρFe/μg·mL1
A
0#1#2#3#4#5#6#
2、试样中铁含量的测定
3只洁净的50mL容量瓶,分别加入适量(以吸光度落在工作曲线中部为宜)含铁未知试液,按步骤(前面步骤1标准曲线的绘制)显色,测量吸光度并记录,由线性回应方程式求出相应的铁含量。(记录格式参考下表)

样品
吸光度A
吸光度A平均值样品浓度
ug/mL
2


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六.注意事项
1)显色过程中,每加入一种试剂均要摇匀。
2)试样和工作曲线测定的实验条件应保持一致,所以最好两者同时显色同时测定。七.思考题
1TA两者关系如何?分光光度测定时,一般读取A值,该值在标尺上什么范围好?为什么?如何控制被测溶液的A值在此范围内?
3

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