(完整版)工程菌的培养

发布时间：2022-12-03 15:24:21

一、工程菌的培养一、实验目的学习工程菌的培养技术二、实验原理工程菌的保藏一般采用甘油法，它是工程菌常用的方法之一。工程菌在低温条件下保藏一段时间后，其活性会降低。因此，工程菌在使用时需要重新活化培养，一般是取少量的甘油菌活化后划线培养，待平板上长出单菌落，挑取单菌落接种至液体培养基上，即得到可使用的工程菌。三、实验仪器及菌种1、三角瓶、无菌超净工作台、培养箱、酒精灯、枪头等2、含有目的基因质粒的大肠杆菌甘油菌（含质粒PUC18）四、实验步骤1、培养基的配制LB液体培养基：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCL5g/L，PH=7.0LB固体培养基：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，NaCL5g/L，琼脂16g/L，PH=
7.02、培养基及器材的灭菌将培养基、枪头、三角瓶、培养皿等放入高压灭菌锅中121℃，灭菌20min。3、无菌超净工作台的灭菌打开无菌超净工作台，紫外灯灭菌30min。4、甘油菌的活化将甘油菌接入附加有抗生素（Kan50mg/L）的液体培养基中，在恒温培养箱中振荡中37℃培养12-16h。5、菌种的划线培养将培养过夜的菌液，用接种环接种至固体培养基，37℃培养12-16h。6、菌种的扩大培养用牙签或者枪头挑取一单菌落接入液体培养基中，在恒温培养箱中振荡中37℃培养12-16h。五、思考题

(完整版)工程菌的培养

推荐内容

相关推荐