ERT2-Cre诱导的Rosa26R-YFP报告基因系统标记小鼠造血干祖细胞的条件和效率检测

作者：罗琦;尹洁;孟歆怿;杨冰;雷蕾;孙琰;李丹丹;王瑾;王玺

作者机构：300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院;300070 天津医科大学基础医学院

来源：国际生物医学工程杂志

ISSN：1673-4181

年：2014

卷：037

期：005

页码：266-270,后插3-后插4

页数：7

中图分类：Q813;Q78

正文语种：chi

关键词：造血系统;造血干祖细胞;c-kit+细胞;ERT2-Cre;Rosa26R-YFP报告基因系统

摘要：目的 探索ERT2-Cre诱导的黄色荧光蛋白(YFP)报告基因系统标记小鼠造血干祖细胞的条件和效率.方法 通过基因型分型的方法,从Rosa26R-YFP小鼠与ERT2-Cre小鼠杂交得到的后代中,筛选出YFP及ERT2-Cre双阳性转基因杂交小鼠;采用免疫磁珠法从双阳性转基因小鼠骨髓细胞中富集c-kit+造血干祖细胞群进行体外培养,并用不同浓度4-羟基它莫西芬(OHT)作用不同时间以诱导YFP表达;流式细胞术检测c-kit+造血干祖细胞中YFP的表达量.结果 Rosa26R-YFP小鼠与ERT2-Cre小鼠的杂交后代共9只,采用基因型分型方法筛选出双阳性转基因小鼠5只;体外培养的c-kit+细胞部分形态发生变化,提示存在细胞分化;流式细胞术检测到c-kit+细胞中YFP表达量可达13.7％.结论 YFP报告基因系统在OHT诱导的ERT2-Cre作用下,能有效标记小鼠造血干祖细胞.

ERT2-Cre诱导的Rosa26R-YFP报告基因系统标记小鼠造血干祖细胞的条件和效率检测