A

仪器初始化及维护

A1

打开COBAS AmpliPrep 和 COBAS TaqMan48 开关，等待仪器初始化完成，为 stand-by 状态。

A2

登陆电脑及 AMPLILINK 软件

(建议电脑应该每日关机)

a) 登陆Windows® XP操作系统（ User ID 和 password）

b) 双击桌面上AMPLILINK 软件图标

c) 登陆AMPLILINK 软件（ User ID 和 password）

A3

通过软件Status界面检查洗液量是否足够，如不够需要更换新的洗液

A4

检查软件维护界面Due 按钮下列出的需要进行的维护内容，按照维护手册进行相应内容的维护工作

COBAS AmpliPrep 仪器自动进行系统初始化工作

B

加载试剂

将所有试验需要的试剂匣从 2-8°C 冰箱拿出，立即放在试剂架上并放入 COBAS AmpliPrep 仪器中，试验开始前在仪器上平衡至少30分钟。不要将试剂匣放在仪器外进行温度平衡，以免在试剂匣表面形成水凝结，造成条码的损坏。如果在试剂匣表面有水凝结，不要对条码部位进行擦拭，以免损坏条码造成仪器无法对条码进行辨识。

B1

将CS1 试剂匣放在一个试剂架上，将试剂匣 CS2, CS3 和CS4 放于另一个试剂架上

B2

将放有CS1的试剂架放入到COBAS AmpliPrep 仪器中的A位置

B3

将放有CS2, CS3 和 CS4的试剂架放入到COBAS AmpliPrep仪器中的B、C、D、E的任一位置

C

加载耗材

注意：根据检测的样本数计算需要的COBAS AmpliPrep 试剂匣数目, 样本处理单元(SPU), 样本管(S-tube), K-枪头(K-tips) 和 K-管(K-tubes) 的数量。 每个样本或质控分别需要 一个SPU, 一个S-tube, 一个K-tip 和一个K-tube 。

C1

加载样本处理单元 (SPUs)

∙ 计算需要SPU数量，一个样本或质控需要一个SPU

∙ 将SPUs 放入到SPU 架中

∙ 向下压SPU的边缘部分（不要碰到S-tip的部分）使SPU完全坐稳在SPU架的

底部

∙ 确认 SPUs 正确的放入在SPU 架中

(若SPUs放置不正确，可能造成仪器运行中停止)

∙ 将SPU 架放入到COBAS AmpliPrep仪器的 J, K 或 L位置

C2

将空的K-carriers 与K-carrier 架关联，放在COBAS AmpliPrep 的O ,P 位置

C3

加载K-tip 架于COBAS AmpliPrep 上M, N位置

D

创建命令和加载样本

D1

样本架准备

∙ 将样本的条码夹放在样本架上相应有样本管 (S-tube)的地方

∙ 将专用于质控的条码夹放在样本架上与阴性质控(-) C, 弱阳性质控L(+) 和

强阳性质控相对应的地方

∙ 注意对相应的质控使用正确的质控条码夹

D2

& D3

通过AMPLILINK 软件创建命令 （见下图）

∙ 在软件orders界面下的Sample rack 按钮下创建样本及质控的命令

∙ 选择相应的检测项目，并进行保存

∙ 打印创建好的样本及质控工作表

D4

&

D5

在生物安全柜中进行样本准备

∙ 涡旋混匀样本及质控3-5秒

∙ 将1000 µl 样本及质控转移到相应的样本管S-tube中

∙ 避免将颗粒或凝块状物质转移到样本管S-tube中

∙ 装有样本及质控的样本管放到样本架相应的位置（与创建好的命令工作表

中的位置一致）

∙ 确保质控条码上的lot 号码与质控的lot 号码一致

∙ 确保相应的质控使用正确的质控条码夹

∙ 避免样本或质控污染样本管S-tube的上部

∙ 转移每个样本或质控需要一个新的加样枪头

D6

∙ 加载带有样本管和K-tubes的样本架于COBAS AmpliPrep 仪器的F, G 或 H位置

∙ K-tube需要放置于样本架上相应的样本管旁边的位置上

E

开始运行COBAS AmpliPrep 仪器

E1

在AMPLILINK 软件上启动运行COBAS AmpliPrep

∙ 检查Status 界面下，确保没有样本、质控或试剂被锁住

∙ 确保所有的样本和耗材都已加载到COBAS AmpliPrep中

∙ 点击Start 按钮

F

COBAS AmpliPrep 仪器运行结束后， 手工转移提取好的样本到 COBAS TaqMan48

应避免将所有提取好的样本及质控直接放置于日光或光源下

F1

∙ 检查AMPLILINK 软件中可能显示的标记flags及错误信息

F2

∙ 在COBAS AmpliPrep处理好的样本及质控必须在120 分钟内转移到COBAS TaqMan 48 中开始反应

不要冷冻或在2-8°C储存处理好的样本及质控

F3

∙ 通过K-carrier 转移工具，手工转移带有 K-carrier 的 K-carrier 架到COBAS TaqMan 48 中

F4

丢弃COBAS AmpliPrep 仪器中的废物

G

开始运行COBAS TaqMan 48

G1

系统自动开始COBAS TaqMan 48 运行

∙ 如果K-carrier上的K-tube数目少于6个，需要用空的K-tube填补K-carrier上空缺位置，AMPLILINK软件会指导需要填补的位置。打开扩增仪的外部盖子，将 K-carrier 放入到扩增模块中并关闭盖子，开始运行COBAS TaqMan 48

H

COBAS TaqMan 48 运行结束

H1

∙ 运行结束，打印结果报告

∙ 检查结果中的标记flags 或错误信息

∙ 接受结果，数据自动备份(archive)

H2

∙ 将检测完毕的K-tubes 从COBAS TaqMan 48中拿出，根据实验室规定进行相应处理或丢弃