第一章—第七章作业

发布时间:


《生物制药工艺》第一章—第七章作业
一、名词解释:
1、生物药物:是、细、代、排泄物)综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物
2、反义药物:以人工合成的十至几十个反义寡核苷酸序列,它能与模DNAmRNA互补形成稳定的双链结构,抑制靶基因的转录和MRNA翻译,达到抗肿瘤和抗病毒作用。3Ks盐析:在pH和温度下改变离子强度(盐浓度)进行盐析,称作Ks盐析法。Ks析法多用于提取液的前期分离工作
4、吸附法(adsorptionmethod:指利用吸附作用性物质和杂质间吸附能力的差异,使目的物和其它物质分离,达到浓缩和提纯目的的方法。5、全排阻:二、问答题
1、基因重组药物与基因药物有什么区别?1.
答:基因重组药物是指应用重组DNA包括基因工程技术和蛋白质工程技术)制的重组多肽、蛋白质类药物和疫苗、单克隆抗体与细胞因子等,药物的化学成分属于多肽或蛋白质;基因药物是以基因物质RNADNA作为治疗的物质基础,包括基因治疗用的重组目的DNA片段、重组疫苗、反义药物和核酶等,药物的化学成分为核酸或其衍生物。2简述生物活性物质分离纯化的主要原理。
分子形状和大小;电荷差异;分子极性和溶解度大小;吸附特性;生物配基特性。3、什么是盐析作用?盐析的原理是什么?
1、向蛋白质溶液中逐渐加入中性盐,高盐浓度时,蛋白质溶解度随之减小,发生了盐析作用。产生盐析作用的一个原因是由于盐离子与蛋白质表面具相反电性的离子基团结合,形成离子对,因此盐离子部分中和了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间电排斥作用减弱而能相互靠拢,聚集起来。盐析作用的另一个原因是由于中性盐的亲水性比蛋白质大,盐离子在水中发生水化而使蛋白质脱去了水化膜,暴露出疏水区域,由于疏水区域的相互作用,使其沉淀。4、有机溶剂沉淀影响沉淀效果的因素有那些?
1)有机溶剂种类及用量(2pH3)温度无机盐的含量4)某些金属离子的助沉淀作用(5样品浓度

1


5、影响吸附的因素有哪些?
1吸附剂的特性:吸附现象在界面发生,因此吸附剂比表面积愈大,吸附量愈多。附剂的机械强度好,吸附速度快②吸附物的性质:能使表面张力降低的物质,易为表面所吸附;一般极性吸附剂易吸附极性物质,非极性吸附剂易吸附非极性物质;溶质从较易溶解的溶剂中被吸附时,吸附量较少;对于同系列物质,吸附量的变化是有规则的;吸附物若能与溶剂形成氢键,则吸附物极易溶于溶剂之中。③吸附条件:温度:吸附热越大,温度对吸附的影响越大;PH值:溶液的pH值溶液pH值可控制吸附剂或吸附物解离情况,进而影响吸附量,对蛋白质或酶类等两性物质,一般在等电点附近吸附量最大;盐浓度;溶剂的影响。④吸附物浓度与吸附剂用量:一般情况下吸附物浓度大时,吸附量也大。6、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量?
当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时,较小分子量在柱中停留时间大于大分子物质,于是样品中各组分即按分子大小顺序分开,大分子物质先出来。对于一个特定的体系,待测物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式
Vb=klogM+b
3个以上的已知分子量标准蛋白过柱,测取各自的V值,一V值作纵坐标,logM为横坐标作标准曲线,在同一系统中测取未知物质的V值可有标准曲线求出分子量。
《生物制药工艺》第八章—第十二章作业
一、名词解释
1、尼柯尔斯基方程式:
其中m1m2C1C2代表树脂上和溶液中的两种离子的浓度。K值的大小取决于树脂和交换离子的性质,以及交换条件。K1时说明离子A1比离子A2对树脂有较大的吸引力;反之,K1A2A1
2偶极离子排斥作用:许多生化物质都是两性物质。其中有些是偶极离子。因为它们即使净电荷为零时,正电中心和负电中心并不重叠,遂成偶极。偶极离子在离子交换过程中的行为是很特殊的。
3、亲和反胶团萃取(Affinity-basedresersedmicellarextraction
4、相对离心力:由于各种离心机转子的半径或者离心管至旋转轴中心的距离不同,离心力而受变化,RCF就是实际离心场转化为重力加速度的倍数5、沉降系数:在单位离心力场中,颗粒的沉降速度
2


6超滤:是一项分子级膜分离手段,以压力差为推动力将不同分子量的物质进行选择性分离。一般用于液相分离,也可用于气相分离。
7、浓差极化现象:外源压力迫使分子量较小的溶质通过薄膜,大分子被截留于膜表面,并逐渐形成浓度度。二、问答题
1、下图为离子交换法应用实例,请填写生产工艺流程中的空格(可选因素:阴离子交换树脂,阳离子交换树脂,0.05mol/L氨水,0.1mol/L氨水,2mol/L氨水)。简述从“滤液”开始,以后步骤的分离原理?

阳离子交换树脂,0.05mol/L氨水,0.1mol/L氨水,2mol/L氨水
滤液调节到pH2.5之后根据氨基酸等电点的不同,依次用0.05mol/L氨水,0.1mol/L氨水,2mol/L氨水洗脱。酸性氨基酸等电点低,因此用0.05mol/L氨水就可洗脱下来,而碱性氨基酸等电点高,因此需用2mol/L氨水才能将之洗脱下来
2、对亲和层析的公式
[L]Ve-7
10进行说明。设KL=10,求[L0]Ve为洗脱体积;V0V0KL
定相(柱床)体积;[L0]为固定化配基浓度;KL为亲和对解离常数(亲和势);只有当阻留值≥10时,亲和层析才是有效(分离)的。1+[L0]/KL10KL=10-7代入得:[L0]/10-79,所以,[L0]9×10-73、试述等密度离心法及其特点。
沿
梯度移动到与其密度恰好相等的位置上(即等密度点)形成区带,这种离心分离方法称为等密度离心法。等密度离心法是根据颗粒的密度差异进行的离心分离的一种方法。特点:1

3


加样位置自由.2)离心平衡后,区带的位置、形状、不受离心时间的影响。(3)梯度的密度范围包括样品所有组分颗粒的密度。4分离依据是密度,与颗粒大小形状无关。5离心力大小,组分颗粒的大小和形状,介质密度梯度的斜率和形状、黏度等影响离心时间和分辨率。
4、透析过程中应注意哪些事项?
1析前,对装有试液的透析袋检查是否有泄漏;2透析袋装一半左右,防止膜外溶剂因浓度差渗入将袋涨裂或过度膨胀使膜孔径改变;3搅拌;定期或连续更换外部溶剂可提高透析效果。
5、影响超滤流速和选择性的因素有哪些?
超滤的透过率和选择性是由溶质分子特性(除了分子量外,还有分子形状、电荷、溶解度等因素)条件等因素决定的。1)溶质分子性质和浓度包括溶质分子大小、形状和带电性质。一般来说,比重大的纤维状分子扩散性差,对一定压力下浓缩一定程度时,大溶质分子很容易在膜的表面达到极限浓度而形成半固体状的凝胶层,使不到极限水平。而且,随着凝胶层的不增厚,原先能透过膜的小分子溶质和溶剂也受阻碍流率越来越慢,形成浓度梯度,但不易形成凝胶层,且随着压力的增加,率的影响是容易理解的。在
稀溶液比浓溶液流率高得多,一般稀溶液浓缩至一便长了过滤时间。(2主要是指膜的孔径、结构及吸附性质超滤膜的孔径大小是过滤选择性的关键因素。在保证分辨率的前提下,使用孔径大的滤膜有利于提高过滤效率。膜结构对超滤分离影响也较大。此外,由于各种膜的化学组成不同,对各种溶液分子的吸附情况也不相同。使用膜时,应尽量择吸附溶质少的3其中包括膜或组合膜的构造、超滤器的结构以及操作压力、搅拌情况和液体物料的温度、粘度、pH、离子强度等因素。
《生物制药工艺》第十三章—第十五章作业
一、名词解释:
1生化药物指以生物化学方法为手段从生物材料中分离、纯化等手段获得天然存在的生化活性物质或将其加以结构改造或人工合成创造出来的自然界没有的新活性物质。比如氨基酸、肽、蛋白质、酶类2、酶促半合成人胰岛素

4


3、粘多糖:有动物来源的含氨基己糖的多糖,又称糖胺聚糖。
4肽的固相合成将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上,然后在此树脂上依次缩合氨基酸,延长肽链、合成蛋白质的固相合成法。二、问答题
1、生化药物的特点?
1)药理学特性有:药理活性高;治疗针对性强;毒副作用较少,营养价值高;生理副作用常有发生等。2理化特性有:生物材料中的有效物质含量低,杂质种类多且含量物制剂有特殊要求。2、以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质,在选择分离纯化方法时应注意哪些问题?根据的蛋白质等电点;分子形状和大小;溶解度;电离性质;功能专一;在溶剂系统中的分配;选择吸附性质;不同来纯化蛋白质;根据蛋白质的某些特殊性质;疏水基团与相应载体基团结合纯化蛋白质。
3、填写胰岛素生产工艺流程中的空格(字母AN表示)
A乙醇、草酸B2.53.0C碱化D8.08.4E碱化液F酸化G3.63.8H去脂I2.02.5J盐析K除酸性蛋白L6.0M除碱性蛋白N8.04、完善SOD生产工艺。
[溶血]
洗净红细胞
E[]FG[]pH7.6的PBS

溶血液
A[]BC离心
上清
[沉淀]D
沉淀物[柱层析]
浓缩液
[溶解]离心
[超滤]
SOD粗酶液
浓缩
上清液
DEAE-SephadexA50
吸附柱洗脱液
[脱盐浓缩]冻干
冻干酶粉
A去血红蛋白B乙醇C氯仿D丙酮E冷冻离心F4G洗脱

5

第一章—第七章作业

相关推荐