高中生物选修一专题2微生物的培养与应用经典练习

1、（2014新课标2,39,15分）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是；然后，将水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为。

（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是。

（3）示意图A和B中，表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。

（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高的利用率。

【答案】 (1)检测培养基平板灭菌是否合格

(2)灼烧将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落

(3)B (4)溶解氧营养物质

2、（2014四川理综，10,11分）有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。

⑴微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、______________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是________________________________________。

⑵与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成___________保存备用。

⑶纯化菌株时，通常使用的划线工具是____________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_________________________________________。

⑷为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是_______________________，该实验设计是否合理为什么_________________________ ______。

【答案】⑴无机盐和氮源 只有能降解利用苯磺隆的菌株才能生存繁殖成菌落

⑵细胞分裂素 母液

⑶接种环（或接种针） 接种环在二区划线前未冷却即划烫死了菌种，或不小心从一区末端的空白处划线

⑷目的菌株通过分泌蛋白酶来降解苯磺隆 不合理，因为该菌种的培养液中已含有分泌出的蛋白酶，对实验结果会带来干扰。正确做法是，将上清液先经高压蒸汽灭菌后再做图乙实验。

3、（2015武汉模拟）尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好的被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示。将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL。实验过程如右图所示:

回答下列问题:

(1)该培养基能筛选出目的菌的原因是。

(2)图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成色，则可说明该菌种能够分解尿素。

(3)在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是，需要消毒的是（填序号）。

①培养细菌的培养基与培养皿②玻棒、试管、锥形瓶和吸管③实验操作者的双手

(4)在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有（填序号）。

①所取土样不同②培养基被污染③接种操作错误④没有设置对照实验

(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉。

故答案为：

（1）酚红 脲酶 氨 红色

（2）目的菌 选择

（3）尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气

（4）稀释涂布平板法 平板划线法 单

（5）灭菌

4、（2015江苏单科）人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃，可用来发酵处理秸秆，为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:

(1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是_________ (填序号)。

①酒精灯②于培养皿③显微镜④无菌水

(2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是____。

(3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养

基,需要用酒精棉球擦净的原因是__。

(4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见右图)。图中降解圈大小与纤维素酶的_________有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是_________ (填图中序号)。

(5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株_________更适合用于人工瘤胃发酵,理由是_________。

(1)③ (2)培养基表面的菌悬液会出现积液,导致菌体堆积,影响分离效果

(3)避免培养基污染棉塞 (4)量与活性①

(5)J4 发酵过程会产热和产酸,J4菌株在较高温度和酸性环境下酶的活性更高

5、（2016全国卷39．15分）

空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题：

（1）该培养基中微生物所需的氮来源于＿＿＿＿＿，若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是＿＿＿＿。

（2）步骤③中，实验组的操作是＿＿＿＿＿。

（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了＿＿＿＿＿现象。若将30（即36－6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法＿＿＿＿（填“正确”或“不正确”）。

[答案]（15分）

（1）牛肉膏、蛋白胨琼脂

（2）将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间

（3）污染不正确

高中生物选修一专题2微生物的培养与应用经典练习