类风湿因子（RF）测试：原理，步骤，解释和临床意义

类风湿因子（RF）是与个体自身免疫球蛋白反应的自身抗体。这些抗体通常针对人IgG的Fc片段。

RF已与三种主要的免疫球蛋白类别相关：IgM，IgG和IgA。在这些中，最常见的是IgM和IgG。关节间隙中免疫复合物的形成导致补体的活化和破坏性炎症，从而引起类风湿关节炎（RA）

如其名称所示，RF特别适用于类风湿关节炎的诊断和监测。类风湿关节炎（RA）是一种慢性炎症性疾病，主要影响关节和关节周围组织。在诊断出类风湿关节炎的病例中，有60-80％的人检出了类风湿因子。

但是，有时在系统性红斑狼疮（SLE）患者的血清中和某些非风湿性疾病中也可以检测到。在正常的老年人口中也可以观察到升高的值。

测试原理

有许多方法可用于测试RF。最常用的血清学方法是基于乳胶凝集试验。由于RF是针对IgG分子Fc部分的IgM类抗体，因此可以通过其凝集涂有IgG分子的乳胶颗粒的能力来检测。

使用的试剂是聚苯乙烯胶乳颗粒在甘氨酸盐水溶液中的悬浮液，pH值为8.6±0.1，并涂有人丙种球蛋白。

定性方法

程序

1. 将所有试剂和标本置于室温。

2. 将一滴阳性对照和40ul患者血清分别放入幻灯片上的圆圈中。

3. 轻轻地在每个要测试和控制的样品圆上添加一滴RF乳胶试剂。

4. 使用单独的涂药棒/搅拌棒将反应混合物散布在特定区域的整个区域。

5. 在旋转摇床上将载玻片前后倾斜2分钟，使混合物缓慢旋转。

6. 2分钟后在明亮的人造光下观察凝集。

解释

胶乳颗粒的凝集被认为是阳性反应，表明类风湿因子的存在处于可检测的显着水平。

阳性结果：乳胶颗粒悬浮液会在两分钟内发生凝集，表明RF水平超过18 IU / ml。

阴性结果：乳胶颗粒悬浮液在两分钟内没有凝集。

半定量法

1. 使用等渗盐水以定性方法1：2、1：4、1：8、1：16、1：32、1：64、1：128等方式制备阳性样品的系列稀释液，如下所示：

1. 对于每个要测试的样品，将100 µL的0.9％盐水加入1至5的试管中。

2. 将100 µL样品加到试管1上。

3. 混合混合物。避免形成气泡。

4. 从管1到2转移100 µL混合样品。

5. 在试管3至4中重复此系列稀释步骤，然后进行5次。混合后，从试管5中弃置100 µL。

6. 试管1至5现在代表如下稀释系列：

2. 使用每种稀释液作为测试样品进行定性测试程序。

解释

滴度报告为最高稀释度的倒数，显示阳性测试结果。在可见的凝集下，读取最后一个稀释步骤中的滴定度，类风湿因子的大致浓度可以如下确定：

RF单位为IU / mL =乳胶γ球蛋白试剂的灵敏度，单位为IU / mL×滴定度。

测试的局限性

1. 在所有诊断为RA的患者中未检测到RF。

2. 患有传染性单核细胞增多症，结节病，系统性红斑狼疮，结核病或麻风病以及其他急性或慢性免疫反应的患者中，RF的含量可能增加。

3. 积极结果的重要性应谨慎解释。应进行定量测试以确诊RA。

4. 高度溶血和脂血的血清以及血浆会干扰测试。

类风湿因子(RF)测试：原理，步骤，解释和临床意义