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发布时间：2023-12-01 20:52:40

河南农业大学考研专业课《现代分子生物学》
课程试卷（含答案）
__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90分钟年级专业_____________学号_____________姓名_____________
1、分析题（5分，每题5分）
1.写出原核表达实验步骤。答案：原核表达实验步骤如下：
（1）按上述步骤提取该组织机构的RNA，反转录为cDNA。（2）以cDNA为模板，用上述引物扩增出带酶切位点的A基因片段。
（3）用BamHI和EcoRI分别切割目的片段和载体，连接酶将A基因和载体连接起来构成重组质粒。
（4）将重组质粒转入感受态的大肠杆菌BL21中，涂布，根据载体标记携带的抗性所筛选出稳定遗传重组质粒的单克隆。
（5）摇菌、扩大培养，待菌液生长到对数生长期，收集菌体，裂解、收集蛋白质。
（6）将总蛋白制备成硝酸通过镍柱，由于A蛋白携带有His标
签，可以被吸附在镍柱上用，然后加缓冲液将吸附在镍柱上的A蛋白洗脱下来，即可得到A蛋白溶液。解析：

2、判断题（55分，每题5分）
1.在克隆载体pBSK质粒中，利用完整的lacZ基因作为筛选标记，白色转化菌落表明重组质粒含有插入片段。（）答案：错误
解析：在克隆载体pBSK质粒中，使用的是部分lacZ基因，而不是完整的。
2.许多蛋白质的三维结构是由其分子伴侣决定的。（）答案：错误解析：

3.限制性内切核酸酶具有极高的专一性，可以识别蛋白质或多肽链上的特定位点，将其切断，形成黏性末端或平端。（）答案：错误
解析：限制性内切核酸酶具有极高的专一性，可以识别DNA双链的特定位点，将其切断，已经形成黏性末端或平端。

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