植物组织培养实验报告

发布时间：2023-03-01 01:36:02

院(系、部 化学与生物工程学院 专业 生物技术（师范） 年级13级 学号 姓名 组别 第二组 课程名称 植物细胞工程学 实验日期 指导老师 实验名称 植物组织培养综合实验 一、 实验目的
1. 熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2. 学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法；
3. 掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4. 了解组织培养的基本程序；
5. 掌握接种的方法和材料的培养过程；
6. 掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7. 观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8. 了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、 实验原理
1. 植物细胞的全能性
一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2. 植物细胞表现出全能性的条件
1. 离体状态；
2. 有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3. 选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3. 无菌条件

把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4. 脱分化与愈伤组织
已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5. 培养基
植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。

植物组织培养实验报告

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