样本采集与处理
发布时间：2020-05-19
样本采集
样本采集要注意的重点就是,所采集的临床标本一定要正确与采集的时间合适,并注意采用正确的标本容器,采集的方法程序对有些临床标本非常重要。在疾病发展过程中,标本采集过早或过晚都可能会给出假阴性结果。
尽可能在最短的时间内完成样本的采集(应该保证30min内完成,不适当的处理时间将直接影响与干扰研究的结果,应尽快降低所采集组织样本的温度。
肿瘤组织标本的采集与处理应遵循严格的生物安全处理规范,也可根据研究者所提出的特殊要求,按照对方提供的操作模式进行相关处理。
(1患者入院后进行生物安全性检查。检测HIV以及嗜肝病毒HBV及HCV感染情况。HIV感染患者不列为采集对象。HBV及HCV感染者,须在样本上明确注明。
(3组织标本取材时间 肿瘤外科手术后,标本离体30min内。 (4标本采集
每种肿瘤主要采集3 类生物样本,并要保证这些样本的质量与数量能够用于DNA、RNA 与蛋白质提取及满足相关的实验分析。 1 新鲜组织(包括手术与活检组织
实体组织样本采集包括外科手术切除的或活检与尸检得到的正常、良性与恶性肿瘤组织。手术结束后,在临床肿瘤病理专家的指导下,在不影响病理诊断取材需要的前提下,采集组织样本。 A。标本取材部位:肿瘤组织、癌旁组织(癌组织旁1cm与正常组织(癌组织旁5cm以外或最远处。
a 临床诊断明确,未经放疗与化疗的手术切除标本,在病理医生指导下取材。 b 尽量保证癌组织没有坏死(有坏死的标本很难提取高质量的RNA 与蛋白。
c 配对“癌旁组织”,选择距离癌灶边缘3 cm 范围内的组织样本,配对“正常组织”,要选择距癌灶边缘5 CM 以上或距离癌灶边缘最远段(或手术切缘处取组织样本,应注明距离。对于空腔器官,如食管、胃、肠、胆囊、膀胱等,“癌旁组织”“正常组织”应取相应部位的“粘膜组织”样本。
d 在保障病理学检测所需标本的前提下,尽量提供足量的肿瘤与癌旁正常组织,一般不少于200mg 或10E7 细胞。
e手术切除的组织样本必须迅速置于液氮中,然后保存于液氮罐或-80℃冰箱,这一过程尽量在手术标本离体后30 分钟内完成。
f 其中一块组织可用OCT 处理后冻存,可用于形态学观察与显微切割。
(OCT(Optimal Cutting Temperature包埋剂就是一种常用的固形剂。用其包埋组织进行速冻后,能与组织固定成形,有利于保存组织结构完整性,便于其形态结构的分析
B。过程:使用数码相机拍摄标本外观后,将标本切成小块(直径0、5cm×0、5cm,厚度<0、5cm,为减少处理时间,标本不应切得太小,然后放入冻存管中,标记后放入标本盒中,盒盖上附有记录标本编号、采集时间及标本类型的标签。每例病人样本保存3-5份冻存管标本。每份组织重量原则上不低于2g。
2 石蜡包埋组织
a中性福尔马林固定手术切除标本按病理学操作规范进行取材
b取材部位包括癌灶,以及癌灶周围3cm 以内的癌旁组织,3~5cm 的近癌组织 与5cm以外的远癌组织或距癌灶边缘最远段分别取2-3 块。取材尽量以癌灶为中心水平向两侧取材,尽量保证足够大的组织样本。取材应该以“远癌-近癌-癌灶”的顺序。癌灶处取材包括癌与正常组织的交界及肿瘤浸润最深处。所有取材的组织块应标明取材部位。
c采集完整的临床病理与随访资料,其中治疗过程与生存期的资料最为关键。 3血液(包括血浆、血清
始终遵循标准防护方法,所有操作均要戴手套。在抽取静脉血时,应当使用一次性的安全真空采血管取代传统的针头与注射器,因为这样可以使血液直接采集到带塞的运输管与(或培养管中。用完后自动废弃针头。每例不低于全血10mL,分装两份。以全血作为待测标本时,必须注意抗凝剂的选择,一般使用EDTA-K3或枸橼酸钠 