生化实验教材电子版
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生物化学实验指导
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实验一糖类的颜色反应...............................................................................................................3实验二糖类的还原作用...............................................................................................................4实验三蛋白质的颜色反应...........................................................................................................6实验四蛋白质的沉淀反应...........................................................................................................9实验五蛋白质等电点测定.........................................................................................................11实验六酪蛋白的制备——等电点沉淀法.................................................................................12实验七氨基酸的纸层析.............................................................................................................14实验八电泳技术——纸电泳分离氨基酸.................................................................................16实验九酶的催化特性.................................................................................................................20实验十糖化酶活力测定.............................................................................................................23实验十一从酵母提取核糖核酸——稀碱法...............................................................................25实验十二从酵母提取核糖核酸——浓盐法...............................................................................26实验十三小麦萌发前后淀粉酶活力的比较...............................................................................29实验十四醋酸纤维薄膜电泳.......................................................................................................30
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实验一糖类的颜色反应
一、实验目的
1．了解糖类某些颜色反应的原理。2．学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。二、实验原理
1.α-萘酚反应（Molisch反应）原理
糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。
2.间苯二酚反应（Seliwanoff反应）原理
在酸作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。三、器材
1.试管及试管架2.滴管3.水浴锅四、试剂
1.莫氏（Molisch）试剂：5%α-萘酚的酒精溶液，称取α-萘酚5g，溶于95%酒精中，并用此酒精使总体积达100mL，贮于棕色瓶内。此试剂需新鲜配制。
2.塞氏（Seliwanoff）试剂：称取间苯二酚0.05g溶于30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至100mL，此试剂需新鲜配制。
3.1%葡萄糖溶液：称取葡萄糖1g，溶于100mL蒸馏水中。
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4.1%果糖溶液：称取果糖1g，溶于100mL蒸馏水中。5.1%蔗糖溶液：称取蔗糖1g，溶于100mL
