报批细节

1、技术档案：

技术人员简历表、培训档案、要求有实质性文件如每人的学历证书、上岗 证、科研成果（课题） 、技术文章、获奖证书等的复印件

2、仪器档案： 实验室所有仪器的购买、使用、校正、放置地点、出厂编号、说明书复印 件等

实验室所有仪器维护校正记录如：加样器、温度计、温湿度计需出具计量 局校正报告文件（可每种只校正一套作为标准） 。 扩增仪需有仪器厂家专业技术人员维护校正报告，和校正后的参数。 加样器的出厂编号、使用时间、校正记录。

5700 维护后验证记录—用同一公司或校准试剂或用自制质控血清并记录 数值

3、其他细节 : 垃圾处理：按生物污染性制品，交医院统一处理。

仪器简单操作流程 标记笔、枪头盒等一些小物品都要标明分区。 仪器的申请、采购、使用、验证程序 样本采集（针对临床医护人员） 、运输、收集程序 样品的唯一编号原则—应区分开不同天、不同种类的标本 标本的保存程序—包括处理前、刚处理后、报告发放后的原始标本（原则 上至少保留一周）应有专人负责。

检测结果的保存、备份记录、质控记录保存，除电脑记录外应有相应的手 抄记录（类似于基因日检测统计表类型的） 。

抱怨记录—应有时间、事件（项目） 、接待人、处理方法、处理结果、处 理人签字确认

注意事项

1、 回答任何问题都应与自己写的 SOP文件相一致."写你所做的,做你所写的".

2、 SOP文件不能写的太虚,无法做到的东西不要写,比如公司版的SOP文件里的 加样器的校准一般实验室就做不到 . 模棱两可也不要写 , 比如"消毒时间一到两 小时"不能这样写,多少就是多少.

3、 处理标本要在生物安全柜内 , 而加样则在柜外 .

4、 各区门口要贴有各区的工作制度 ,限入标志.还要准备两个登记本 ,一个来记录 紫外消毒,一个来记录工作人员出入 .区内还要有一个工作记录本 ,用来记录各 区每天的工作内容 , 便于监测每天的工作全过程 .

5、 每把枪的用途要清楚 ,不能弄乱.比如稀释阳模的枪和处理标本的枪不可混用 .

6、 普通离心机处理分泌物标本时应在离心后静置 20分钟才能开盖 .（ 许斌这样认 为）

7、 所有仪器、设备都要有档案卡 .

8、 所有的清洁消毒要在实验结束后马上进行 , 尤其是仪器、设备 . 像扩增仪，每 天都要清洁，做完的反应管决对不能留在样品槽内。

9、 各区的拖把、抹布不得混用 , 标记清楚 .

10、 生物防护意识要强 , 手套要随时更换 . 生物防护安全的保证要从三个方面 : 制 度、硬件、意识。

11、 爆管如何处理:立即停止实验,水浴里的水要倒掉 ,冲洗.所有可能污染的地方

要用消毒液擦洗 ,紫外照射,通风排风.

12、 各区应有日常工作核查表 , 做为每天工作记录的补充 .

13、 各区要有泡有消毒液的生物污物桶 , 用来处理生物垃圾 .

14、 验收组带来的标本要按平时对待临床标本一样处理 , 要有接收记录 , 结果登记

等.

15 、拒绝电话或代领等非正常方式发放报告单 .

16、 存放标本的冰箱要上锁 , 钥匙及电脑资料的密码要由本科室人员专人保管 .

17、 报告单上要注明试剂的检测下限 , 不能写成参考范围 . 除了有操作者 , 还要有 核校者,且两者姓名除了电子打印还要用手签 .定量结果不能有阴阳性提示 ,

只能报数值 .

18、 SOP文件中PE5700的温湿度要求应该为温度 15-30C、湿度为＜ 80 %。

19、 SOP中

医院申报实验室注意事项

专家组参观实验室回答的问题

1，“你们的冰箱的铁链我可以从底下抽上来，实验室能做好保密性 吗？

可以的，你们能做到就行，注意保密！

2，实验室需要配置冷冻离心机，生物安全柜，如果做 HCV 时,注意 重新添置新实验室。

3，生物防护中是否有锐器的防护注意事项？ 4，实验室的温湿度计的放置位置？ 最好放在实验室内。

5，实验室中如何做好离心管抑制物的检测？ 而非爆管、裂管的检测！

6，在做 HCV 时规定从抽血化验到送达实验室要几个小时要有明规 定！

3 小时左右！ 7，溶血标本有何具体的判断标准？脂血呢 ？ 实验室末次会议的提问

1，你们单位（达安）试剂，当我们新鲜标本做 HBV 时，提取中 40 微升+40 微升提取液处理，待放置过夜后，第二天加样时，有的标本

特难取样，有何处理办法？

2，实验室中垃圾你们如何处理的？

3，实验室中阴性标准检测后变成阳性你怎么办？（我们实验室一共 有三管阴性阴性对照， 第一个阴性检测管是试剂什么都不加， 直接上 机，第二个阴性检测管是试剂中加入在实验开始时打开盖的 1.5 离心 管带有蒸馏水的， 第三个阴性检测管是与实验一起提取的阴性血清。 ） 4，实验中如果阳性质控，阳性梯度，标本呈阴性请分别解释？ 5，实验室必须配置生物安全柜，高速离心机 ！

临床基因扩增检验实验室技术验收现场问卷

（口试和 / 或笔试）

一.现有一个患者向你提出：“我在你们医院检测HBV DNA为阳性，但在另

一家医院检测为阴性，你们医院是怎么做的检测？” ，此时，你怎么办？

（该题主要是考实验室人员是否知道并遵守所制定的抱怨处理程序）

二.现有一个临床大夫拿着几张HBVDNA定量PCR佥验报告单找到PCF实验 室，说：“你们的PCR吉果到底准不准，我这个病人刚开始检测， HBV DNA是 5

x 107拷贝数/ml，用了拉米呋啶治疗后二周，再检测结果为 3X 107拷贝数/ml，

降了不少，但再过二周检测，又变成了 6X107拷贝数/ml，升高不少，这到底是 怎么回事？”，如果这个大夫刚好问的是你，你怎么办？并如何解释其提出的问 题？

（该题除了考实验室人员是否知道并遵守所制定的抱怨处理程序外，还要求

其对特定PCR佥验的批间变异有充分的认识）

回答思路：

这两题分别对应患者和临床医生提出的抱怨。 考点为你是否按照所制定的程 序来处理： 无论是患者还是医生提出抱怨，我们都应该“按照”程序先记录抱 怨人姓名、抱怨内容等，然后等问题解决后记录处理结果等，最后记录反馈意

而非“内容”。所以题目中无论病人抱怨的是服务态度不好还是结果报告不准，

医生抱怨的是检测结果和临床诊断不符还是报告发放不及时， 回答的方向都应该 是：“我们接待他们后，先在登记表上记录抱怨的什么什么相关信息，做相应处 理，解决后记录处理结果，最后填反馈表，归档总结，跟着以后改进等等等等” 对各种具体问题的处理就按照实际情况来回答就行。

如果题目中出现要你具体 “解释某某提出的问题” 时，这时是具体考察某一 “内容细节”了。第二题中看你对 PCR检验的批间变异有否充分的认识：一般 PCF检测试剂盒存在着一定的批间甚至批内差异，而且PCF检测前处理也存在着 一定的误差， 分析软件相关参数的选择也会使定量结果发生变动， 这是方法学造 成的不可避免的事实。同一操作人、同一仪器、同一批号试剂、同一份标本同时 做多份平行管， 得到的结果都会不尽相同。 所以我们都会允许结果存在一定范围 的偏差，一般为一个数量级的拷贝数。5X107、3X107和6X 107均在允许的误差 范围内，排除了各种影响因素后， 出现这种情况很正常， 这说明了该病人用药效 果不佳。若定量结果有1〜2个数量级甚至更大的变化才能反映用药疗效。

三．现有一人打电话到科室，说： “我孩子在你们医院做了一项丙肝的 PCR 检测，名字叫XXX请你告诉我检测结果好吗？” 。如果是你刚好接了这个电话， 你会怎样去做？

（该题考的是实验室人员在患者要求以电子邮件、电话、传真等方式传递 报告时，是否能按相应的程序去做）

回答思路：

也是考形式。“对于这种非正常的报告发放形式，我们按照程序，是这样 这样处理的。”因为各个医院实际情况不同，所以无论你怎样处理，只要程序中 体现了对患者结果的保密原则，具体细节不会太要求。

在程序中按以下几个方式写都是可以的：

1 、我们均不以任何非正常形式发放报告。 （最干脆！就是有点不近人情， 不过对我们来说省事）

2、 实在有特殊情况，可以电话查结果，其它发放形式不行。但必须确认 身份，包括核对其所查询的患者姓名、 性别、年龄、 检测项目、送检医生、 送检日期、病区床号等情况，并提供患者 ID 号。

3、 可以通过电话、图文传真、电子邮件等形式传送结果，和上面一样， 需要核实身份。（最宽松了，不过麻烦了很多） 要注意的是：这些情况均应明确告知查询者，这几种非正常形式发放的报 告均仅为临床提供参考，实验的最终结果以正式检测报告单为准。特殊情 况报告发放后需详细登记，签署报告人姓名，实验室负责人签字。

“报告的正确发放”为考核重点，一般可能还会引申出“你们是如何发放 检测结果报告？” 之类的问题， 按照程序中写的实际情况回答就行的了。 只要遵 循保密原则就 OK。

最简单的无非把事情都推给医院：说门诊患者报告单送至服务台门诊报告 发放处，由那里的医生确认身份后发放。 （具体她们是怎么确认、确不确认这已 经不关我们的事了）。

若写病人到科室领报告也行，只是“我们怎么确认病人身份”要在程序中 体现：询问相关信息、 根据收费单或病历唯一条形码 （若医院采用计算机网络系

统）确认等等。

四．现有你科室同事，拿了一份血清标本给你，说： “这是我一个熟人的标 本，他要做HCVRNA佥测，刚好他还做生化和免疫检测，我从生化标本分了一些 出来，给你做HCV RN。你觉得这样行吗？为什么？

（该题主要是考实验室人员对有关标本的收集程序是否清楚并遵守）

回答思路： 问到了“为什么？”表示具体考到细节了。按照我们的收集程序，做 PCR 尤其是RNA项目需要独立取血，不能从其它检测的标本中分出一些来做。 而且对 RNA标本的采集、保存、运输都有严格的要求。

一般验收组会对这类问题加以引申。 问你每天标本在哪儿采集？采血的人员 有否经过专门培训？采集的标本如何保存？

还可以顺便问你结果发放后的标本如何保存、 保存在哪儿？保存多久？甚至 要你把这多久多久前的标本拿出来给他们看。

五•某一天，你在做 HBV DNA荧光定量PCR检测（方法的定量测定范围为 103〜107拷贝数/ml ）中，发现有1份标本的测定Ct值超出方法的测定上限，此 时你怎么办？对于没有特异扩增曲线的标本你又怎么报告结果？

回答思路：

此为具体问题：题目已经假设了方法的定量测定范围为 103〜107拷贝数/ml， 我们就按照这个假设来考虑。 先看是否为特异扩增的曲线 （即看曲线是否为标准 的S形曲线），若为标准S形曲线表示的确为阳性标本，Ct值超出检测上限，表 示未知标本HBV DNA浓度过大，不在检测线性范围内，应该进行浓度梯度稀释

（1/10、1/100、1/1000……），重做实验，看哪个梯度处于线性范围内，得到原 始浓度乘以相应稀释倍数即得。

若不是特异扩增的曲线 （也就是常见的那种前面翘、 与阈值线有交点的阴性 曲线，计算机不会具体分析，见有交点就给 Ct 值，而且 Ct 值还很小，小于测定 上限的 Cycle 数），按阴性报。

六.在PCR佥测的核酸提取离心中，如发现有一管离心管出现破裂，此时你 怎么办？

（该题是考实验室人员对于其制定的实验室及仪器设备消毒清洁程序是否知道 并遵守）

回答思路： 按照离心机的消毒清洁程序： 必须先停止实验， 将破裂管密封放入生物垃圾 桶，再用 75%酒精擦拭离心室消毒，用移动紫外灯照射 30〜 60 分钟后才能开始 实验。

可以引申出：离心管破裂，可能质量有问题，为防止以后同类事情的发生， 按照耗材质检程序进行离心管质检实验， 若不合格停止使用， 重新购买并进行质 检，合格的耗材才能使用。

七•有一个PCR实验室的荧光定量PCR仪如ABI 7000因某种原因搬动到了 另一个实验台面，实验室只是将仪器外表面擦了擦，即用于常规扩增检测工作， 你觉得该实验室做得对吗？为什么？

（该题是考实验室人员对于其制定的 PCR仪校准程序是否知道并遵守）

回答思路：

考核实验室人员对于其制定的PCR仪校准程序是否知道并遵守。仪器移动应 该按照程序进行校准后才能重新用于常规扩增检测工作，以保证实验结果。

7000型核酸扩增荧光检测仪为复杂精密仪器，其校准工作需由专业工程师 进行。实验室联系仪器厂家派技术人员来校准仪器。

平时就算不搬动仪器，实验室也应与仪器厂家达成协议，定期校准仪器。

八.有一位实验室工作人员在做 PCR实验中，一开始将化验单带至标本处理区， 核酸提取完成后，进入了扩增区，但将化验单忘在了标本处理区，此时，他应该 怎样做？

（该题是考实验室人员对于其制定的实验室单一流向工作程序是否知道并遵守）

回答思路：

PCR实验室报批细节、注意事项、常见问题问答